POC(Point-of-Care)又稱即時檢測，是IVD行業的一個細分領域，指在采樣現場進行的、利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到檢測結果的一種檢測方式。

POCT技術最早始于20世紀中期，由Edmonds以干化學制片測量血糖及尿糖，隨后由Ames公司將其檢測項目擴大并商業化。由于方法簡便快速而得到普遍應用。近20年來，POC檢測的發展在全球范圍內是肉眼可見的速度在突飛猛進。

中國自2015年POCT第一股上市開始，以每年超過20%的速度快速增長，預計2027年整體市場超過260億元，遠超全球POCT行業7.4%的發展速度，已經是我國IVD行業增長最快的細分領域之一。

來源：前瞻產業研究院

為了更好的理解POC檢測，為其技術的發展指明方向，已有幾個標準來評估POC檢測的適用性。其中包括WHO的ASSURED標準，FDA的CLIA標準，以及在新冠之后提出的STARLITE標準。

來源：//doi.org/10.3390/ijms232214110

在新冠疫情期間，POCT通過實際場景的應用自證了其技術的成熟性和可靠性，尤其是分子POCT檢測技術的廣泛運用。

等溫擴增(如HCA、MDA、NASBA和LAMP等)在分子POC診斷中發揮了越來越重要的作用。等溫擴增具有與qPCR相似的靈敏度和特異性，但是在快速、低成本和便攜性方面具有優勢，因此成為在資源有限環境下使用POC檢測的理想選擇。

近幾年來，等溫擴增技術的進步，尤其是在實時檢測、多重擴增和基于芯片的檢測方面的發展，提高了等溫擴增的靈敏度和準確性，可以說是徹底改變了POC行業，為更快、更方便的診斷鋪平了道路。

在多種等溫擴增技術中，LAMP是最常用的方法，它可實現在恒定溫度（60-65oC）下對DNA或RNA靶標進行高效、特異和快速擴增。在相同時間內，LAMP擴增 效率比傳統 PCR高100倍。不過，LAMP技術也有一些限制，例如具有較高假陽性率，引物設計復雜、重復性不太好。

另一種等溫擴增技術，基于核酸序列的擴增（Nucleic acid sequence based amplification，NASBA）也越來越受歡迎，它的核心優勢是能在更低的溫度下（~41°C）下直接擴增RNA,只需要使用2個特異性引物P1/2，因此在引物設計方面就沒那么復雜，更容易優化。

與使用Bst酶鏈置換活性的LAMP擴增不同，NASBA擴增是依賴AMV逆轉錄酶、RNase H和噬菌體T7 RNA聚合酶活性進行的反應。

其兩個特異性引物與目標RNA序列雜交，并通過逆轉錄酶生成DNA的互補鏈（cDNA），然后將其作為模板合成多個RNA副本。新的RNA鏈和cDNA模板通過變性和再變性分離并重新連接。這一過程在反轉錄（產生更多的cDNA）、RNA合成和指數級RNA擴增的循環中重復進行，可在90分鐘內將目標片段擴增10¹²倍以上。

NASBA反應的反轉錄過程被直接合并到擴增反應中，因此該技術最適合分析RNA樣品。樣品中DNA、肝素、檸檬酸鹽、血紅蛋白、白蛋白和脂質等的污染將不會對結果造成影響，因而適用于可能不適合其他試驗檢測的樣品。且反應溫度較低，因此是細菌、病毒等多種病原微生物POC診斷的理想選擇。