最近的新型冠狀病毒（COVID-19）爆發(fā)，給全球衛(wèi)生帶來了巨大的挑戰(zhàn)。為了支持戰(zhàn)“疫”，2月14日，美國麻省理工學院Broad研究所聯合哈佛大學、麻省理工學院McGovern研究所以及其相關合作機構宣布，免費提供可能有用的信息，包括通過共享可能支持潛在診斷技術發(fā)展的信息。

這其中，就包括CRISPR基因編輯大神張鋒教授、Omar Abudayyeh和Jonathan Gootenberg開發(fā)的一種基于CRISPR的診斷COVID-19技術的詳細操作流程文檔。

目前，新型冠狀病毒可以通過qPCR進行診斷，但是由于缺乏試劑和設備，疾病檢測進展緩慢。基于CRISPR的COVID-19診斷技術利用的是張鋒教授團隊2017年發(fā)布的SHERLOCK技術。此前，基于CRISPR-Cas13的SHERLOCK系統(tǒng)已經被證明可以準確地檢測出病人樣本中存在的大量不同病毒。該系統(tǒng)搜索唯一的核酸特征，并使用類似于驗孕紙的試紙來提供一個可視的讀數。將試紙浸入準備好的樣品后，試紙上會出現一條線，表明是否存在病毒。

基于這個理論，研究小組利用合成的COVID-19 RNA片段，設計并測試了兩種識別COVID-19兩個特征的向導RNA。一種識別新冠病毒的S基因，另一種識別Orf1ab基因。當它們與Cas13蛋白結合時，就形成了一個能夠檢測COVID-19病毒RNA的SHERLOCK系統(tǒng)。

通過條帶位置的不同，很容易就能確認新冠病毒是否存在。

該系統(tǒng)具有特異的高靈敏度，每微升里僅10-100個病毒拷貝，就可以被檢測出來。且步驟簡單，只需三步，一小時內就可以完成檢測：

·?利用常規(guī)的42℃同溫擴增技術，對提取的核酸樣本進行擴增。這一步需要25分鐘。

·?在步驟1的樣本中加入Cas13蛋白、向導RNA以及起到報告作用的特殊分子，在37℃下繼續(xù)反應30分鐘。

·?使用試紙對步驟2中獲得的樣本進行檢測，結果應該在5分鐘內出現。

值得注意的是，這一技術尚未在患者樣本上進行驗證。任何診斷都需要開發(fā)和驗證才能供臨床使用。張鋒教授團隊歡迎研究人員與他們合作，并可以提供一個初學者工具包來測試該系統(tǒng)。如有可能，也可供檢測COVID-19樣本的研究人員使用。

附技術文檔全文：